惨了！师哥发觉实验室细胞污染了，不舍得丢掉，结论他延毕了......

解螺旋微信公众号·陪着你科学研究的第2939天

细胞人的悲惨世界

没被细胞塑造操纵过的科研之路不值一过。刚，我细胞又污染了，文章内容又被拒了，老师逼我写份试验总结，氛围都衬托到这了，我便可以借此机会先跟我们聊一聊大家实验室《细胞人的悲惨世界》。

做为一枚实验室打职工，来实验室的时间段不长，我却认识了师兄弟养细胞的各种各样凄惨旧事。如下所示：

我有一个师兄弟，刚进实验室还没学好养细胞，就由于用量杯煮咖啡，泡面，住进了医院门诊，好在没啥生命威胁，老师吓得已经把他纳入实验室信用黑名单。

我有一个小师妹，很自信心，养了大半个月的细胞忽然全军覆灭，她心理状态完全崩了，只能依靠谈恋爱减轻丧失细胞小宝宝的痛。

我有一个师哥，发觉细胞污染了，一时优柔寡断另加天性勤俭节约，没舍得扔，造成全部实验室的细胞遭受污染，最终把全部细胞连着耗品培养液所有弃去，危害了自身及全部实验室的进展不用说，结论悲剧延毕了。

我还有一位学姐是养细胞大神，实验室每个人在问她同一个问题：“学姐，师姐，我细胞又污染了，这可咋整呀？”

一开始学姐还很热心的帮大家找缘故，之后她苦不堪言，就为大家写了篇每个人传颂的《实验室小白七不必》，一大学毕业就加入黑名单了大家养细胞很菜的人。

以她十几年的养细胞工作经验而言，一般实验室初学者细胞污染发生的缘故可以从七个层面来入手处理。如果你通读并记诵下列《实验室小白七不必》，养细胞之途此后顺心如意，发SCI指日可待。如今我带大伙儿课前预习下，防止惨剧再次出现。

一、不必丢掉无菌检测意识，乱配戴，瞎吃吃喝喝

实验室人多口杂，难管理方法。刚进实验室的同学们通常会怀着懒散和心存侥幸，有时进细胞房不想脱鞋套，不想佩戴口罩，乃至不戴手套，遮阳帽，也有人们在实验室用量杯冲咖啡，煮方便面。

要了解，脱鞋是为了更好地防护细菌。佩戴口罩是为了避免口腔科衣原体污染细胞。德国黑蚂蚁生精片58元不戴手套，压根就消除不掉手上的细菌细菌。对于在实验室吃吃喝喝就相当于自尽，导致污染就不多说了，重要就是你还想或者摆脱实验室吗？

假如你明知道，以上不标准个人行为，是实验室大避讳，还重犯，那么你真没救了。

请大伙儿一定要记牢：进无菌车间前洗手消毒，按照规定穿隔离衣；姿势要轻，不必交头接耳；应用栽培基质前不适合太早开盖；汲取栽培基质、细胞混悬液时，专职专用型。

二、不必乱放置沉积试验用具

超净工作台里实际操作时，门口最避讳堆一堆杂七杂八的物品，但是，有的同学们枪头盒、血清蛋白、管道，细胞培养皿、移液器、酒精喷壶、酒精喷灯，堆积成山，也没有好好地梳理过他们。

你需要了解，一旦他们塞住了安全柜门口的通风口，便会有双向不良影响。这样子实验过程下去会非常容易手足无措，造成姿势力度过大，搅乱气旋。

也有便是，这种积聚的试验用具一旦遮挡出风口，也会搅乱超净工作台的气旋，气流转变会造成外界不清洁的气体注入，也一样会造成超净工作台的清洁功效无效。

三、不必滥用紫外光和乙醇杀菌

紫外线和乙醇较多只有灭病菌，对细菌损害不大。有的朋友居然不戴手套，仅用喷水壶喷手。洁净台要尽可能用酒精棉球而不是用酒精喷壶，由于用酒精棉球得话，可以在杀菌的一起把菌体从手里擦下来，而喷水壶只有简短的灭了下菌罢了。有这一问题的同学们，记牢一句话就可以了，常用药棉，少用喷水壶。

四、别忘记按时清除恒温水浴锅

水浴锅是实验室很容易忽略的一种存有，恢复细胞的情况下，37℃对细菌真菌而言便是苗床。恢复细胞后，湿乎乎的冻存管，任你再如何喷乙醇也并沒有什么意义了。

因此，一定要按时清理恒温水浴锅，在清理时尽量加一些抑菌剂。留意：并不是要往里加法抗，恒温水浴锅里得加2%的氢氧化铜，尽管这很容易浸蚀恒温水浴锅。总而言之，记牢一定要按时清理。

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五、别忘记管理方法水盆

细胞培养箱的水盘腿拥37℃苗床的水环境，水盆里若是漂着尤其大的一块块霉点，一污染就一小箱子全损毁了，因此，一定要记牢，细胞培养箱要定时用0.1%的新洁尔灭或是84清理，更替应用，避免 微生物菌种耐药性。

防止水盆污染也很重要，水盘里添加饱和状态的磷酸氢二钠可以有效的防止细菌真菌，可是必须按时添加去离子水避免 进行析出。

六、不必瞎杀菌

要记牢，细胞房全部在使用的枪头，务必要通过湿热灭菌，用旧报纸包囊好枪头，那样做是由于灭菌锅一般在细胞房外边，因此要确保内部结构枪头盒清洁。

烘干是为了避免内部结构有水份，如果你打开枪头盒后，存水的地区更易于被黄曲霉菌的胞子所触碰粘附，也就更非常容易污染，因此，杀菌灭不太好的同学们，一定要通读并记诵下了这一杀菌规律，倘若再不按标准实际操作，自身惩罚自己吧。

来跟读了：细胞塑造常用物件清理、消毒杀菌要完全，各种各样水溶液杀菌除菌要细心，并在抽样检菌一周后确定无菌检测才可以应用。

七、不必随便丢掉细胞，更不必不丢掉被污染细胞

假如你实验室标准比较有限，猜疑细胞污染了，提议大伙儿试一下细胞污染后的急救措施，方式 如下所示，诸位且背且爱惜。

最先要分辨污染源，一旦发觉细胞有污染的征兆或已污染，马上分辨有可能的污染源：有没有实际操作不合理？培养液、胰酶、PBS等色调、回应度是不是正常的？

次之要妥善处理，若明确原有的培养液、胰酶、PBS可以用，则再次应用；若不能明确则新配完全培养基、PBS、胰酶，原来的溶液在明确是不是污染后再做解决。

如果是黄曲霉菌污染，在以PBS润洗2~3遍后换液，不用添加浓度较高的法抗。塑造48h后污染再次发生时，再再行添加就可以。

如果是细菌污染，在PBS润洗、换液后可添加两性霉素B（两性霉德国黑蚂蚁生精片多少钱一盒素B有细胞毒副作用，不建议应用），也可添加300μg/mL氟康唑塑造，污染操纵后改成150μg/mL塑造2~3代

假如质疑是衣原体污染，则可开展PCR检验或同时应用衣原体消除实验试剂。也可选购诺氟沙星注射剂，于洁净台内开启立即加入到培养液中，以20μg/mL浓度值2代后改成10μg/mL浓度值不断塑造约2周。

假如是以其他地方转来或者自身修建的细胞系，要留出充裕的冻存贮备，一旦猜疑产生交叉式污染，必须搞好细胞细胞生物学层面的评定。

但是，虽然我觉得不必随便丢掉未确认污染的细胞，应试着拯救，但倘若标准容许，细胞产生污染后最佳的处理过程是：所有丢掉！！！

* 需注意，明确污染的细胞千万别留有，你是否还记得前边师哥的遭受吗？

@全部细胞初学者

我坚信犯了以上这种养细胞罪行的试验菜狗，不仅一个人，细胞塑造中的常遭遇的BUG也远远不止这种，因此，今日为了更好地帮你处理细胞初学者遭遇的诸多难点，防止将来越来越多的细胞被大家弄伤，耽搁大家发SCI。

提议可以先把这篇文章储存下来，如果你碰到问题的过程中再看来或许会更有感觉。

细胞塑造是一个不断发展的全过程，要想变成大咖，看2~3篇文章内容哪够？在日常搞好累积，质量互变规律才会出现变质，学姐规定大家每个人需读的《细胞塑造（第3版）》则多方位详细介绍了细胞塑造的各个方面，实则一本非常好试验秘笈，接受就可以成功发SCI！

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做为一本养细胞的经典著作，这本书自创立至今也是赞许持续，我顺手给大伙儿放两根阅读者五星好评，供各位参照。

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